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2009-06-26
流式Annexin-V/PI双标对照组的设定
实际操作中应设立以下几组
1、不染色的细胞:作为阴性本底,消除细胞自发荧光
2、发生凋亡细胞AnnexinV-FITC单染
3、发生凋亡细胞PI单染
2、3为颜色补偿调节,亦可判断试剂染色效果
4、活细胞+凋亡细胞双染:为调整设门位置,使细胞分群合理
前四个组只为建立检测方案及验证试剂
5、活细胞双染:主要考察操作原因造成的细胞损伤情况
凋亡细胞可用微波炉对细胞进行短时间加热(视细胞不同有差别,一般10~30s,有些肿瘤细胞对热特别敏感不适用)或用多聚甲醛短时间固定。
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